Ambiental: Aulas praticas -1ª série

AULAS PRATICAS DE BIOLOGIA 1ª SÉRIE

Organizadares

Marilda Bezerra Martins Analista

Terezinha Vinhote Meireles

Revisora

Eliane Salete Hirt

APRESENTAÇÃO

O presente trabalho constitui-se como um apoio aos professores de Biologia do Ensino Médio da Rede Pública Estadual de Roraima. A organização deste material surgiu pela iniciativa de se criar orientações que promovam a integração dos conteúdos biológicos com os materiais de multimídia , aulas de campo, de laboratório de ciências da natureza e de informática,para compreensão dos conteúdos bem como a utilização de técnicas e métodos utilizados na pesquisa de iniciação cientifica e tecnológica em Biologia.

Assim, tendo em vista as orientações das Diretrizes Curriculares da disciplina de Biologia, as tecnologias disponíveis nas escolas, a escassez de material destinado aos alunos do ensino médio e as dúvidas dos professores quanto ao encaminhamento metodológico dos conteúdos de natureza complexa e abstrata, organizamos uma sugestão de atividades de autores diversos, de acordo com os conteúdos da proposta curricular da disciplina. Apresentamos sugestões de atividades com diferentes

estratégias de ensino que poderão auxiliá-lo a ampliar a abrangência e o aprofundamento do conteúdo. Desejamos que este material contribua para novos estudos e

aprimoramento de metodologias e práticas pedagógicas compatíveis com as

Necessidades de nosso tempo.

A forma de organização desse material pretende um novo olhar para o ensino de biologia, tendo a perspectiva de que este proporcione, através de visualizações diferenciadas, uma efetiva compreensão e sensibilização para a criatividade num aprofundamento metodológico e teórico.

O professor terá também a opção de levar os alunos ao laboratório de informática da escola para trabalhar a aula, visualizando a apresentação do tema no próprio computador, ou ainda, como segunda opção, poderá realizar a gravação da pasta do tema em pen-drive para ser desenvolvido em sala, utilizando a TV-multimídia ou TV pendrive.

AULAS PRATICAS, 1ª SÉRIE-

ENSINO MÉDIO

Boa Vista / RR

Setembro/2012

ravessa do lado menos concentrado em soluto (o interior da célula) para o lado mais co

Atividades Práticas de Biologia

prof Arlindo Costa

PRATICA 01

.IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES

Extração de DNA

Material: cebola grande - 250 gramas; Sal de cozinha - 3gramas; Detergente neutro - 10ml; Álcool etílico

95% gelado; Papel filtro, tubos de ensaio, funil banho-maria a 60oC

Metodologia:

Picar a cebola em pedaços pequenos. Bater no liquidificador e reservar 25g

Preparar 100ml da solução de extração: 3g de sal, 10ml de detergente. Completar com água destilada até

100ml.

Junte a cebola com a solução de extração em um frasco e deixar em banho-maria a 60o C durante 15

minutos. Em seguida, resfrie colocando o recipiente em gelo.

Coe a mistura em papel filtro e recolha o filtrado em um tubo de ensaio.

Despeje, delicadamente, o etanol 95% no tubo de ensaio.

O DNA sobe para o etanol, no qual é insolúvel, ficando preservado e visível

Roteiro de aula prática

IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES

Pratica 02

amido é um polissacarídeo cuja unidade monossacarídica é a glicose. Apresenta-se sob duas formas:

amilose, que consiste de longas cadeias não ramificadas e que na presença de iodo, dão coloração roxoazulada,

e amilopectina, que contém cadeias altamente ramificadas e dão coloração marrom-avermelhada.

transparentesAmbas estão presentes em proporções variáveis nos tecidos vegetais de reserva.

01 - Teste de coloração do amido - Tuberculus tuberosae (batata inglesa)

Cortar, com a gilete, um pedaço muito fino e pequeno do interior da batata e colocar sobre uma lâmina.

Corar o material com Lugol por 5 minutos. Cobrir com lamínula. Observar.

02 - Euforbia splendens (coroa de Cristo)

Pingar sobre a lâmina uma gota de látex da coroa de Cristo dissolvido Cobrir com lamínula. Observar.

Pratica 03

Atividades Práticas de Biologia

· Lipídios

Os lipídio se classificam em simples e compostos. Entre os compostos podem ser diferenciados os lipídios

figurados, que são visíveis em forma de gotas refringentes e os mascarados, que são demonstrados por

análises químicas.

03 - Citrus sp (laranja e limão)

Fazer um corte tangencial bem fino na casca da laranja ou limão de maneira que possa passar a luz que

nele incidir. Colocar sobre um vidro de relógio e pingar algumas gotas de Sudan IV e corar por sete minutos.

Retirar o corte com um pincel e colocá-lo sobre uma lâmina. Cobrir com lamínula. Observar.

· Proteínas

Reação de biureto: o sulfato de cobre (CuSO4) em meio alcalino reage com compostos contendo duas ou

mais ligações peptídicas, resultando um complexo de coloração violeta. A intensidade da cor é proporcional

ao número de ligações peptídicas existentes.

Pratica 04

04 - Leite e clara de ovo

Pipetar 0,5ml de: 1)solução de clara de ovo diluída em água; 2)leite; 3)água e 4)gelatina. Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de CuSO4 a 1% e 05 gotas de NaOH 2,5N. Observar se ocorrem

alterações de cores e explicar.

Pratica 05

Reação Xantoproteica: o ácido nítrico (HNO3) reage com os anéis benzênicos dos aminoácidos triptofano,tirosina e fenilalanina, formando nitro compostos amarelos em meio alcalino. Realizar em conjunto com a com a prática 06

Pratica 06

05 - Leite e clara de ovo

Pipetar 0,5ml de: 1) solução de clara de ovo diluída em água; 2)leite; 3)água e 4)gelatina.

Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de HNO3 concentrado e 05 gotas de NaOH

20%. Observar se ocorrem alterações de cores e explicar. OBS.: Evitar respirar os odores (gases)

liberados pelo HNO3. Manuseie-o com cuidado!!Realizar em conjunto com a prática 06.

Relatório: Entregar ao final da aula.

Observar todas as lâminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. Identificar os amiloplastos e a morfologia dos grãos de amido. Identificar as bolsas de óleo ou depósitos de lipídios e verificar se a concentração de lipídios é a mesma em todas a sua extensão.

Pratica 07

IDENTIFICAÇÃO DE GLICOSE NOS ALIMENTOS

MATERIAL

* açúcar de cana; * água; * álcool; amido; * colher de chá; conta-gotas; estante para tubos de ensaio; etiqueta; * fósforos; frasco de 22 ml; * frutas de época; funil; glicose; lamparina; papel filtro, disco; pinça de madeira, para tubo de ensaio; reagente de benedict; régua; tubo de ensaio, 15 mm x 125 mm

PROCEDIMENTO

1- Etiquetar os tubos de ensaio e numerá-los de 1 a 5.

2- Colocar água nos tubos 1,2,3 e 5, até a altura de 2 cm.

3- Acrescentar ao tubo 1: ½ colher de glicose.

4- Acrescentar ao tubo 2: ½ colher de amido.

5- Acrescentar ao tubo 3: ½ colher de açúcar de cana.

6- Colocar no tubo 4 suco de fruta filtrado até a altura de 2 cm.

7- Pingar em cada um dos tubos 10 gotas de reagente de Benedict. Observar a cor das soluções e anotar em uma tabela.

TUBO SOLUÇÃO DE COR + REAGENTE DE BENEDICT COR + AQUE-CIMENTO
1 glicose
2 amido
3 açúcar de cana
4 suco de fruta
5 reagente de Benedict

8- Ferver separadamente cada um dos tubos durante 1 minuto. Observar a cor das soluções

e anotar na tabela.

RESULTADO

TUBO SOLUÇÃO DE COR + REAGENTE DE BENEDITC COR + AQUECIMENTO
1 glicose cor azul Passa a verde depois a amarelo
2 amido cor azul Não se altera
3 açúcar decana cor azul Passa a verde depois a amarelo
4 suco de fruta cor azul Passa a verde depois a amarelo
5 reagente de Benedict cor azul Não se altera

Pratica 08

. IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS NOS ALIMENTOS

MATERIAL

* água; ** balança; bastão de vidro ou de plástico; * clara de ovo crua; colher de chá; conta-gotas; estante para tubos de ensaio; etiqueta; frasco de 150 ml; glicose; hidróxido de sódio; proveta; sulfato de cobre; tubo de ensaio, 15 mm x 125 mm

PREPARAÇÃO PRÉVIA

O professor deverá preparar com antecedência as seguintes soluções.

Solução de hidróxido de sódio a 10%

Dissolver 10g de hidróxido de sódio em um pouco de água.

Completar com água até obter100ml de solução.

Solução de sulfato de cobre a 0,5%

Dissolver 1g de sulfato de cobre em um pouco de água. Completar com água até obter 200ml de solução.

Guardar os excedentes das soluções para futuras repetições

PROCEDIMENTO

1- Etiquetar os tubos de ensaio e numerá-los de 1 a 3.

2- Colocar 2 ml da solução de hidróxido de sódio a 10% e cada tubo de ensaio.

3- Acrescentar 5 gotas de sulfato de cobre a 0,5% a cada tubo.

4- Acrescentar 2ml de clara de ovo ao tubo 1.

5- Acrescentar 1 colher de glicose ao tubo 2.

6- Acrescentar 2ml de água aos tubos 2 e 3.

7- Agitar os tubos até homogeneizar as misturas e comparar suas colorações.

RESULTADO

No tubo 1, a cor da mistura muda de azul para violeta, indicando presença de proteínas.

Nos tubos 2 e 3 a mistura permanece azulada

Pratica

Onde está o amido?

O que você precisa:

- água

- tintura de iodo (comprada em farmácia)

- copos descartáveis de café, pratinhos ou fundos de garrafas plásticas

- conta-gotas

- alimentos diversos: batata crua, arroz cru, arroz cozido, pedaço de pão, pedaços de frutas e de legumes, farinha de trigo, leite, sal, açúcar e amido de milho.

Como fazer:

1. Coloque um pedaço de cada alimento em um pratinho (ou fundo de garrafa de refrigerante ou copinho de café).

2. Dilua um pouco da tintura de iodo: em um copinho de café com água, coloque 5 gotas de tintura de iodo. Se você não tiver desse copinho, use um copo pequeno comum, complete até a metade com água e coloque cerca de 10 gotas de tintura de iodo.

3. Pingue algumas gotas da tintura de iodo diluída em cada alimento. Se não tiver conta-gotas, derrame com cuidado um pouco da sua solução sobre os alimentos. Observe a coloração dessa solução nos diferentes alimentos.

O amido de milho comercial é o que chamamos de "controle positivo" em sua experiência. Como estamos procurando o amido nos alimentos, a coloração que encontrarmos nesse amido comercial será a coloração que vai aparecer em todo o alimento que contiver amido. Qualquer outra cor indica, então, que não existe amido no alimento testado.

O sal de cozinha é seu "controle negativo", pois nele não encontrará amido.

Anote o que aconteceu com os outros alimentos e tente entender o que está acontecendo.

O que está acontecendo?

O amido é uma molécula complexa formada pela ligação de várias moléculas de glicose, A glicose é um açúcar (ou carboidrato) simples e facilmente consumido pelas células, tanto animais como vegetais. O amido é muito complexo e não consegue entrar em uma célula.

Ele serve como uma "substância de reserva" em muitas plantas. Ou seja, o amido serve como fonte de glicose para as plantas e para os animais que consumirem essas plantas. Não devemos encontrar o amido em alimentos de fontes animais como o leite, por exemplo.

A reação que observamos aqui é da formação de um complexo de iodo e amido. O iodo se liga no amido, através de uma reação química, dando origem a um composto de coloração azul. Se a solução de iodo não for diluída, o azul é tão intenso que parece arroxeado.

CUIDADO!!!

A solução de iodo é usada como anti-séptico, ou seja, ela tem a propriedade de matar algumas bactérias, alguns vírus e alguns fungos. Serve para desinfetar feridas mas não deve ser ingerida pois pode causar danos ao seu organismo (ela é tóxica!).

O envenenamento pelo iodo causa vômitos, diarréia, sede, sabor metálico na boca e desmaio.

NÃO COLOQUE A SOLUÇÃO DE IODO NA SUA BOCA!

CUIDADO TAMBÉM COM SEUS OLHOS.

CITOLOGIA

Estudo da célula

Autores:

Paul Regina Rodrigues
Eduardo Bessa P. da Silva
Tania Elisa Matsumoto

Contexto:

Esta aula será introdutória ao tema célula , já devem ter noção das características dos seres vivos tais como o ciclo de vida, nutrição, respiração, reprodução, movimento, excreção e sensibilidade.

célula;

Pratica 09

Construir o conceito de relação entre os universos micro e o macroscópico.

Material utilizado:

 Modelo de célula em cartolina;

 Gravuras das organelas em cartolina ou papel colorido (Anexo 1);

 Transparências com os principais conteúdos da aula;

 4 Folhas de cartolina;

 Revistas com figuras para serem recortadas;

 Canetas hidrográficas, tesouras e cola.

Dinâmica:

No início da aula será feita uma introdução sobre as principais funções celulares relacionando-as às diferentes organelas citoplasmáticas. O professor deverá induzir a construção do conceito da relação entre o universo micro e o macroscópico, uma vez que, são as organelas que determinam o funcionamento das células, e estas o funcionamento dos tecidos.

Os alunos serão divididos em grupos e o professor, depois da discussão, oferecerá um modelo de célula para cada grupo 1, mais um conjunto de figuras que representem as diversas organelas citoplasmáticas

Anexo 1) para que os alunos montem uma célula. O docente fornecerá exemplo de células específicas, isto é, que realizem uma determinada função (por exemplo, digestão, excreção) e os alunos deverão relacionar os tipos de organelas correspondentes às funções apresentadas e que são desempenhadas por um determinado tipo de célula.

Ao final da aula, serão vistas transparências de células animal e vegetal e, nesse momento, os alunos poderão observar seus modelos de célula e comparar as suas hipóteses e expectativas com a apresentação do professor.

Pratica 10

Observando as células da cortiça

A cortiça é um material de revestimento produzido no tronco de certas árvores, como o sobreiro (Quercus

suber), com o qual se fabricam rolhas e outros utensílios. As características de maciez e de leveza da cortiça

chamaram a atenção do citologista pioneiro Robert Hooke, que observou esse material ao microscópio e

batizou de “células” suas microscópicas cavidades. É simples e interessante observar fatias bem finas de

cortiça, e assim se transportar, em imaginação, às épocas iniciais da Citologia.

Com o auxílio de uma lâmina de barbear nova, corte as mais finas fatias que conseguir de uma rolha de

garrafa de vinho (ou algum outro material de cortiça). As fatias devem ser praticamente transparentes, de modo

a ter poucas camadas de células de espessura. Coloque as fatias de cortiça sobre uma lâmina de microscopia

e cubra com uma lamínula (não use água). Observe primeiramente em menor aumento. Se a fatia de cortiça

ficar muito grossa, tente observá-la perto das extremidades, onde geralmente o corte sai mais fino. Sugira aos

estudantes que façam desenhos do material observado, anotando o aumento utilizado. Peça que comparem

seus desenhos com os de Hooke reproduzidos no livro.

PRATICA 11

ROTEIRO DE AULA PRÁTICA

DIFERENÇAS ENTRE CÉLULAS ANIMAIS E VEGETAIS

Prática - Observação da mucosa bucal.

Raspar a mucosa bucal com o auxílio de uma espátula de madeira. Com o material colhido fazer um

esfregaço fino e transparente sobre uma lâmina seca. Deixar a lâmina secar movimentando-a no ar. Corar o

material com azul de metileno ou orceína acética durante 5 minutos. Cobrir com lamínula e observar ao

microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematizar o material observado.

Prática - Observação da epiderme de pimentão (Capsicum annuum).

Faça um corte fino, pequeno e transparente na casca do pimentão. Deposite sobre a lâmina e adicione uma

gota de cloreto de zinco iodado. Cubra com lamínula (retirar excesso de corante com papel filtro se

necessário) e observe ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Na objetiva de 40x fechar levemente o

diafragma. Faça outro corte, corando-o com hidróxido de amônia. Aguarde alguns segundos, cubra com

lamínula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessário) e observe ao microscópio como

anteriormente. Esquematize as observações.

Pratica 12

ESTUDO DE CÉLULAS VEGETAIS

Células da epiderme inferior de Setcreasea purpurea.(cebola)

Retirar um pedaço da epiderme inferior da folha de Setcreasea e colocar em uma lâmina contendo uma

gota de água destilada. Cobrir com lamínula. Retirar o excesso de água se necessário. Observar ao

microscópio com objetivas de 10x e 40x. Retirar a lâmina do microscópio e pingar uma gota de cloreto de

zinco iodado ao lado da lamínula. Sem retirar a lamínula e com o auxílio de papel filtro, faça o cloreto de

zinco substituir a água debaixo da lamínula. Aguarde alguns minutos e observe novamente ao microscópio.

Esquematize as observações.

Pratica 13

Prática - Epiderme do catáfilo de Allium cepa de cebola

Destacar um pedaço da epiderme do catáfilo da cebola e colocar em uma lâmina contendo uma gota de

cloreto de zinco iodado. Não deixar o catáfilo enrugado, esticando-o se necessário. Cobrir com lamínula

(retirar excesso de corante com papel filtro se necessário) e observar ao microscópio com objetivas de 10x

e 40x. Esquematize as observações

Prática 14

Folha de Anacharis sp (Elódea)

Destacar um folíolo de Anacharis e colocar em uma lâmina contendo água. Cobrir com lamínula e observar

em objetiva de 10x e 40x. Esquematize as observações.

Relatório: Entregar ao final da aula.

Observar todas as lâminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as

estruturas celulares observadas

Pratica 16

OBSERVAÇÃO DE ORGANISMOS PROCARIONTES:

Prática - Bactéria da coalhada (iogurte - Bacilo lacteo).

Sob uma lâmina coletar uma pequena porção de coalhada. Pingar uma gota de água e dissolver bem. Fazer

um esfregaço, tomando-se o cuidado de identificar o lado da lâmina no qual encontra-se o esfregaço. Secar

bem a lâmina, podendo utilizar chapa aquecida. Pingar 3-4 gotas da mistura álcool-clorofórmio. Secar o

preparado movimentando a lâmina no ar. Em seguida, pingar 2 gotas de azul de metileno, espalhando-o

pela lâmina. Aguardar 5 minutos, lavando com água destilada. Limpar o excesso de água e levar ao

microscópio para observação em objetiva de 10x e 40x. Fechar um pouco o diafragma após a localização

do material. Represente o material observado.

Prática - Bactérias do vinagre (Acetobacter aceti).

Sob uma lâmina coletar pequena porção da madre do vinagre azedado (película formada na superfície)

Faz-se um esfregaço, secando-o lentamente em chama ou placa aquecida. Pingar 2-3 gotas de azul de

metileno, fazendo-o correr pela lâmina. Aguardar 10 minutos, e lavar a lâmina em água corrente. Adicionar

glicerinPrática - Reconhecimento de bactéria e algas azuis.

Prepare as culturas A e B com antecedência de 3 a 4 dias. No frasco A coloque cerca de 10 grão de

pimenta do reino e 100ml de água filtrada. Fechar o frasco, deixando-o em local pouco iluminado. No frasco

B coloque grama com raiz, bem picada, forrando o fundo do frasco.

Pratica 17

OBSERVAÇÃO DE ORGANISMOS EUCARIONTES:

Prática - Células de levedo.

Tome uma porção de fermento de pão, dissolvendo-o em água morna. Junte açúcar, deixando descansar

por 15 a 20 minutos. Pingue uma gota da suspensão sobre uma lâmina, cubra com lamínula e observe ao

microscópio. Em seguida, fixe o material passando a lâmina sobre uma chama. Corar 5 minutos com violeta

genciana. Lavar rapidamente em água corrente, cobrir com lamínula e observar ao microscópio com as

objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observações.

Prática - Identificação de vários tipos de protistas.

Com antecedência de 6 a 7 dias prepare as culturas A e B. Coloque alface picada em uma frasco (A) e

grama picada em outro (B). Acrescente a ambos alguns grãos de arroz cru e 100 ml de água filtrada. Deixe

os frascos em local arejado e iluminado, sem exposição direta ao sol. Depois de alguns dias cobrir os

frascos com papel filtro ou algodão. Coloque uma gota da cultura (A ou B - colha a película que se forma na).

superfície ou o sedimento do fundo) em uma lâmina, e observar ao microscópio com as.

Pratica 18

Coloração de gran

Objetivos

Execução da técnica de coloração diferencial de Gram. Nesta técnica de coloração são usadas quatro soluções: dois corantes, um mordente e um descorante.

Informação

É a coloração mais utilizada em bacteriologia. É uma coloração diferencial porque permite colocar as bactérias em dois grupos: bactérias Gram positivo e bactérias Gram negativo. O comportamento diferente das bactérias para reter o corante é, provavelmente devido a diferenças nas camadas superficiais da parede. Regra geral, os microorganismos Gram (+) reagem de modo diferente dos Gram (-) contra muitos agentes físicos e químicos.

Material

Cultura microbiana

Álcool

Lâminas e lamelas

Microscópio

Solução de cristal de violeta

Lugol

Solução de safranina

Ansa

Óleo de imersão

Caneta de acetato

Bico de Bunsen ou lamparina de álcool

Papel de limpeza

Tina de vidro

Procedimento experimental

1- Limpar a bancada com álcool e ligar o bico de bunsen.

2- Esterilizar a ansa à chama e tirar uma gota de cultura.

3- Fazer um esfregaço.

4- Cobrir a preparação com cristal de violeta e deixar actuar durante 1min.

5- Rejeitar o corante e lavar com lugol. Deixar actuar durante 1 min.

6- Descorar com álcool ou acetona iodada.

7- Lavar com água.

8- Cobrir o esfregaço com solução de safranina e deixar actuar durante 1 min.

9- Lavar com água.

10- Secar entre dois papeis de filtro.

11- Observar na lente de imersão.

Pratica 19

Montagem de um modelo tridimensional de

uma célula animal

Esta atividade propõe a construção de um modelo didático para visualização das estruturas de

uma célula animal.

Os alunos deverão construir o modelo com os materiais que acharem necessários. Abaixo,

segue uma lista com sugestões. Caberá aos alunos decidirem, entre os materiais disponíveis,

àqueles que mais se assemelham às organelas celulares.

Um recipiente de plástico (um pote, por exemplo) pode ser utilizado para abrigar as organelas,

devendo ser preenchido com o parafina em gel (incolor) que representará o citoplasma.

A parafina em gel deve ser aquecida em um béquer (ou outro recipiente apropriado) sob fogo

brando até ser completamente liquefeito. Para evitar a formação de bolhas, mexa o gel

suavemente. A montagem do modelo pode ser feita como descrito abaixo.

Uma vez de posse do recipiente plástico e feita a escolha dos materiais a serem utilizados,

organize as organelas e a parafina em gel em camadas. Coloque uma primeira camada de

parafina e espere seu resfriamento. Distribua algumas organelas sobre esta primeira camada

de parafina. Cubra novamente com parafina e, após o resfriamento, distribua outras organelas.

Repita esta operação até ter distribuído todas as organelas. Por fim, uma última camada de parafina deverá ser colocada de forma a cobrir completamente as organelas, evita

Lista de alguns materiais que podem ser utilizados:

- massa de modelar azul (complexo de Golgi);

- massa de modelar verde (retículo endoplasmático liso e rugoso);

- miçangas grandes ou bolinhas de gude (lisossomo);

- uva-passa ou miçangas pequenas (ribossomo);

- castanhas de caju ou gomos de tangerina (mitocôndrias);

- macarrão tipo "penne" (centríolos);

- fita colorida (DNA);

- gel colorido (núcleo);

- parafina em gel (citoplasma);

- pote plástico e saco plástico pequeno.pequeno

Dica!Para abrigar o núcleo, um pequeno saco plástico

Dica!Para abrigar o núcleo, um pequeno saco plástico pode ser utilizado. Preencha-o com o

gel colorido (gel fixador de cabelo funciona muito bem).

PRATICA 20

MEMBRANA PERMEABILIDADE

Permeabilidade de uma membrana biológica

Objectivos

Estudar a permeabilidade de uma membrana biológica.

Informação

A difusão simples é um processo físico responsável pelo transporte de certas moléculas pequenas através de uma membrana, no sentido de concentração decrescente.

Material

Tubo diálise

Tubo de ensaio largo

2 tubos de ensaio

Gobelé

Suporte de tubos de ensaio

Banho-maria a 100ºC

Amido

Glucose

Reagente de Benedict

Solução de Iodo ou Lugol

Procedimento experimental

1- Lavar muito bem os tubos de ensaio com água.

2- Colocar num gobelé o tubo de ensaio largo cheio de água desionizada.

3- Cortar o tubo de diálise, previamente mergulhada em água desde o dia anterior.

4- Atar uma das extremidades.

5- Colocar uma solução de amido até encher aproximadamente metade do tubo de diálise.

6- Encher o tubo de diálise com uma solução de glucose até à altura de dois dedos da extremidade.

7- Apertar a extremidade que não foi fechada com os dedos e passar por água.

8- Colocar e prender o tubo de diálise dentro do tubo de ensaio que já se encontra no gobelé com um elástico.

9- Deixar em repouso durante 30 minutos.

10- Para testar a presença da glucose e do amido utiliza-se o teste de Benedict e a solução de lugol, respectivamente.

No caso da glucose, o teste é positivo quando se obtém no final uma cor vermelha acastanhada.

No amido, a cor inicial da suspensão é castanha e passa para azul escura quando o teste é positivo.

13- Colocar 2 ml da solução que se encontra dentro do tubo de ensaio com o tubo de diálise para um tubo de ensaio limpo e, em seguida, adicionar duas gotas de reagente de Benedit.

14- Colocar num banho a 100ºC durante 2-3 minutos. Observar.

15- Colocar 2 ml da solução que se encontra dentro do tubo de ensaio com o tubo de diálise para um tubo de ensaio limpo. Adicionar 4 gotas de lugol ao tubo e agitar. Observar.

16- Abrir cuidadosamente o tubo de diálise e adicionar 4 gotas de iodo à mistura amido/glicose. Observar.

PRATICA 21

MODELO MOSAICO FLUIDO - MEMBRANAS BIOLÓGICAS

100 Bolinhas de isopor com 3 cm de diâmetro (cabeça polar dos lipídeos).

70 bolinhas de isopor de 1 cm de diâmetro (açucares do glicocálix e cabeça do colesterol).

12 m de fio de arame liso (1 mm) para a cauda dos lipídeos.

50 cm de tubo sanfonado de 2,5 cm (proteína-canal)

2 m de fio colorido de várias cores (4 a 6 cores), bitola 1,5 (proteínas).

1 bastão de cola quente(1 cm de largura e 30 cm de comprimento).

1 folha de isopor para apoiar o modelo.

1 alicate

1 tesoura

1 estilete

canetas coloridas.Pratica 0smose

PRATICA 22

OSMOSE COM OVO PELADO

Do que você precisa:

1 vidro com tampa

1 ovo cru

1 garrafa de vinagre branco

Como fazer:

1. Coloque o ovo dentro do vidro, com cuidado para não trincar a casca.

2. Adicione o vinagre, devagar, até cobrir todo o ovo.

3. Tampe o vidro e observe que aparecem várias bolhas na superfície do ovo! Parece até que está efervescendo.

4. Depois de 2 horas, troque o vinagre do frasco. Para isso, retire o ovo com cuidado usando uma colher de sopa. Não tem problema de segurar o ovo com seu dedo quando for jogar o vinagre fora, mas lave a mão depois disso. Retorne o ovo ao frasco e coloque um novo vinagre, cobrindo o ovo.

Aguarde alguns dias e você terá um ovo sem a casca, ou seja, um "ovo pelado". Se colocar o frasco contra a luz, você poderá ver a gema que está dentro desse ovo.

O que está acontecendo?

O que você viu acontecendo foi uma reação química em que houve liberação de um gás (as bolhas que saiam da casca).

O vinagre contém ácido acético em sua composição e esse ácido reage com um composto chamado carbonato de cálcio que é responsável pela formação da casca do ovo.

As bolhas que se formam durante a reaçã é do gás carbônico (ou dióxido de carbono) que, em química, é representado por CO2.

Esta experiência está descrita em vários sites e existe até mesmo no site do Exploratorium. As fotos abaixo são de lá! Veja uma sugestão bem legal deles na experiência "Teste a osmose com o ovo pelado".

Depois de tirar a casca, você pode segurar esse ovo, com cuidado para não romper a membrana que mantém a forma do ovo, pois sem a casca ele fica muito frágil.

Saiba um pouco mais sobre o ovo de galinha

O ovo de galinha tem uma composição química bem rica. A casca tem a função de proteger o ovo que, se tivesse sido fecundado, daria origem ao pintinho. Os ovos que consumimos não são fecundados (ou "galados") e, por isso, não nascem pintinhos a partir desses ovos.

A casca do ovo contém poros que permitem a entrada de ar, o que auxilia o crescimento do embrião, caso o ovo tenha sido fecundado. A clara é composta, basicamente, por proteínas, um tipo de composto importante para nosso organismo, de alto valor nutricional. A gema é mais rica em nutriente e contém muitas vitaminas, proteínas e lipídios, além de sais minerais.

Quando toda a casca é consumida pela reação com o ácido do vinagre, o ovo mantém sua forma pois contém uma

Teste a Osmose com o Ovo Pelado

Dissolva a casca do ovo - sem quebrar a membrana que contém o ovo. Depois, use o seu "ovo pelado" para testar a osmose, o movimento de água através de uma membrana.

Do que eu preciso?

Dois ovos pelados (prepare-os como descrito na experiência desse link).

Vasilhas onde que seja possível colocar 1 ovo e algum líquido (pode ser uma caneca)

Xarope de milho (pode ser encontrado como glicose de milho*)

Água

1 colher de sopa

*Saiba mais: No mercado, o xarope de milho pode ser encontrado como GLUCOSE de milho. Usar o termo glucose, em português, está errado. Em português, o correto é dizer GLICOSE, que é um tipo de açúcar ou carboidrato. (nota da tradutora)

O que eu faço?

1. Coloque um dos ovos pelados dentro de uma caneca e adicione glicose de milho suficiente para cobrir o ovo. Coloque o outro ovo em outra caneca e adicione água, cobrindo o ovo. Coloque os dois ovos na geladeira por 24 horas.

2. Depois de 24 horas, observe os dois ovos. O que aconteceu?

O que está acontecendo?

O ovo que estava imerso na água está inchado e firme. O outro que estava no xarope de milho está murcho e flácido.

Depois que você dissolveu sua casca, o ovo está envolvido por uma membrana. (Na verdade, existem duas membranas, mas elas estão bem juntinhas). Essa membrana tem uma permeabilidade seletiva - ou seja, ela permite que algumas moléculas passem através dela, mas bloqueia a passagem de outras moléculas.

A água passa facilmente através dessa membrana do ovo. Moléculas maiores, como as moléculas de açúcar do xarope de milho, não passam através dessa membrana.

Quando você coloca um "ovo pelado" no xarope de milho, você está criando uma situação em que a membrana do ovo está separando duas soluções com concentrações diferentes de água. A clara do ovo tem cerca de 90% de água na sua composição; o xarope de milho tem apenas 25% de água. Nessa situação, o movimento da água através da membrana faz com que as moléculas de água movam do lado onde ela está mais abundante para o outro onde ela está escassa (ou seja, onde tem menor quantidade de água). Dessa forma, a água migra de dentro para fora do ovo, deixando-o murcho e flácido.

O que mais eu posso tentar?

• Você imagina como fazer para que o ovo flácido torne-se novamente firme? Aqui está o que nós fizemos.

Experimente colocar os "ovos pelados" em outras soluções. O que acontece se você coloca o ovo em água colorida com corante de alimento? Ou então em água salgada? Experimente e veja. Com cuidado, pegue o ovo flácido de dentro do xarope de milho e coloque-o num frasco com água. Deixe o ovo na água por 24 horas. A água vai migrar do lado onde está mais abundante (o lado de fora do ovo) para o lado onde a água está menos abundante. Depois de 24 horas, o ovo vai estar firme de novo.

Conte seus resultados para nós!

Pratica Osmose 23

Duas batatas inglesas cruas

Uma faca sem ponta (ou uma faca de plástico)

Uma colher de café

Sal

Açúcar

5 pratos descartáveis

Guardanapos de papel (ou Papel toalha)

Caneta de retroprojeção ou fita crepe

1. Corte as batatas ao meio.

2. Faça um buraco, utilizando a colher, no centro de 3 metades de batata.

3. Seque bem as metades de batata com papel toalha ou guardanapo.

4. Marque 3 pratos, escrevendo com caneta de retroprojeção ou usando a fita crepe: "açúcar", "sal" e "controle". Os outros 2 pratos serão marcados com "açúcar" e "sal". Os pratos devem estar limpos e secos antes de começar a experiência.

5. Coloque uma metade de batata em cada um dos pratos descartáveis, com o buraco voltado para cima. Se por acaso você não conseguir colocar as metades em pé, você pode fazer um corte plano no lado oposto ao buraco da batata para que ela fique equilibrada no prato. PEÇA AJUDA DE UM ADULTO!

6. Adicione uma medida de açúcar no buraco da batata marcada "açúcar" e uma medida de sal no buraco da batata marcada "sal". Na batata marcada "controle", não coloque nada.

É importante que você coloque dentro do buraco a mesma quantidade de açúcar e de sal, nós usamos uma colher de café, mas pode ser uma tampinha de refrigerante, por exemplo.

7. Nos outros pratos sem batata, coloque uma medida de açúcar e uma de sal,

8. Aguarde alguns minutos observando para ver o que vai acontecer.

Atenção!!! Tome muito cuidado ao usar a faca para cortar as batatas ou dê preferência ao uso de faca de plástico.

Depois de alguns minutos você vai notar que tanto o açúcar quanto o sal que estão nas batatas ficaram molhados. Sem batata, nem o sal e nem o açúcar ficam molhados! O que será que aconteceu? De onde veio essa água? As batatas mudaram de cor? Mudaram de consistência? E a metade “controle”, o que aconteceu com ela? Tem água em volta das batatas, nos pratinhos, ou apenas no buraco?

O que você acabou de observar é um fenômeno chamado de osmose e acontece todo o tempo em diferentes organismos. A osmose acontece quando moléculas de água atravessam as membranas celulares de um lado menos concentrado em soluto (neste caso os solutos usados foram o sal e o açúcar) para o lado mais concentrado. Note também que a consistência das batatas que passaram pelo fenômeno de osmose mudou, agora ela estão mais “mole”. A osmose aconteceu no sentido de tentar diluir o soluto adicionado. Porque não acontece a osmose no sentido inverso? Porque o sal e o açúcar não penetraram nas batatas?

A batata inglesa utilizada nesta experiência não é um fruto mas, sim, um tipo de caule subterrâneo (tubérculo). Seu nome científico é Solanum tuberosum e ela pertence à família botânica Solanaceae. A batata, como todo ser vivo, é formada por um tecido que, por sua vez, é constituído de várias células que estão bem próximas umas das outras. Sabemos, também, que 70 a 80% dos organismos são constituídos de água.

Nesta experiência, a água contida no interior das células da batata atravessa as membranas celulares por osmose: a água atncentrado em soluto (onde está o sal ou o açúcar).

Note que a consistência da batata mudou, agora ela está mais “mole”. Compare com a batata controle! A batata controle está bem mais firme. Isto ocorre porque as células da batata perderam água e ficaram “murchas” este fenômeno se cham a Plasmólise.

Note também que as células da batata não absorveram os solutos! Podemos dizer que as membranas dessas células não são permeáveis a estas moléculas mas são permeáveis a água. Ou seja, nem o sal e nem o açúcar, nossos solutos, não conseguem passar através das membranas das células da batata. Esta propriedade da membrana conhecida como Permeabilidade Seletiva.

Em breve, você poderá saber mais sobre células e tecidos em Curiosidades!

Esta experiência foi enviada pela bióloga Rosilane Taveira da Silva. Depois de testarmos de algumas formas diferentes, essa foi a melhor maneira de "ver" a osmose.

Pratica 24

Osmose em células vegetais

Objetivo

Estudo da osmose em células vegetais.

Informação

Osmose é um tipo particular de difusão que envolve apenas a difusão da água através de uma membrana selectiva permeável.

Neste trabalho, a direcção do movimento da água na osmose é determinada pela concentração do soluto (substância dissolvida) na solução, confrontando com a concentração do soluto contida no interior de células de batata.

Com o passar do tempo, o movimento da água dá-se para fora ou para dentro da amostra de batata de acordo com o gradiente de concentração de soluto. A perda ou o ganho de água causa uma mudança no tamanho das amostras de batata.

Material

Cilindros de batatas

Solução de sal (NaCl) a 20%

Solução de sal (NaCl) a 0,9%

Água desionizada

Pinças

Régua

Papel adsorvente

Procedimento experimental

1- Cortar uma batata em 3 cilindros uniformes com 7 cm de comprimento e 1 cm de diâmetro.

2- Em diferentes recipientes, colocar os cilindros de batata e cobrir um com uma solução de NaCl a 20%, outro com uma solução de NaCl a 0.9% e o terceiro com água desionizada.

3- Deixar em repouso durante 1 hora.

4- Usando as pinças remover cuidadosamente, os cilindros de batata dos recipientes e colocá-los em diferentes toalhas de papel.

5- Medir o mais correctamente possível os comprimentos dos cilindros, em cm, com uma régua. Anotar os resultados na tabela.

Concentração da solução	Comprimento do cilindro (cm)
Solução NaCl 20%
Solução NaCl 0.9%
Água desionizada

Colocar os cilindros de batata para o recipiente original.

Pratica 25

DNA

Construindo uma molécula de DNA comestível

Material necessário:

- 1 saco de jujuba ou massa de modelar de diferentes cores
- 1 caixa de palitos de dente
- arame fino e flexível
- 1 alicate
- 1 régua

Como fazer?
1 Corte o arame em dois pedaços de aproximadamente 40 cm cada.

2 Escolha quatro cores de jujuba, que representarão cada um dos nucleotídeos da molécula de DNA. Separe as cores que farão pares entre as fitas de DNA (você pode combinar a jujuba laranja com a vermelha e a amarela com a roxa, por exemplo).

3 Espete as jujubas nos arames, respeitando os pares escolhidos. Se você escolheu a combinação de cores acima, se em um arame você coloca a jujuba amarela, no outro coloque o seu par roxo. Lembre que ao longo de todo o DNA esses pares devem ser respeitados.

4 Coloque os palitos entre as jujubas para fazer a ligação entre os dois arames. Coloque 3 palitos ligando pares iguais de jujubas (por exemplo, 3 palitos ligando as roxas com as amarelas) e 2 palitos ligando os outros pares (por exemplo, 2 palitos ligando as vermelhas com as laranjas).

Torça lentamente cada parte do arame. Pronto, você tem em mãos uma simulação da molécula de DNA!

Depois de mostrar para todos em sua casa ou escola, se delicie com sua molécula de DNA!
Você pode fazer também uma cópia da molécula de DNA e distribuir para seus pais e colegas. É só separar os

dois arames da sua molécula de DNA e usar cada um deles como molde para fazer novas moléculas.

Pratica 02

ATIVIDADE DE LABORATÓRIO: Extraindo DNA do bulbo de cebola

A seguir fornecemos uma técnica simples de extração de DNA que pode ser realizada no laboratório ou

mesmo em sala de aula. Apesar de simplificados, os procedimentos empregados na técnica são muito

parecidos aos dos laboratórios bioquímicos, permitindo ao estudante visualizar macroscopicamente o aspecto

do material hereditário.

A extração de DNA de células eucarióticas consta fundamentalmente de três etapas: a) ruptura das células

para liberação dos núcleos; b) desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e

proteínas; c) separação do DNA dos demais componentes celulares. O bulbo de cebola foi usado por apresentar

células grandes, que se rompem facilmente quando a cebola é picada.

O detergente desintegra os núcleos e os cromossomos das células da cebola, liberando o DNA. Um dos

componentes do detergente, o dodecil (ou lauril) sulfato de sódio, desnatura as proteínas, separando-as do DNA

cromossômico.

O álcool gelado, em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma

massa filamentosa e esbranquiçada.

Material necessário

uma cebola grande (± 200 g)

faca de cozinha

dois copos tipo americano

banho-maria (± 60 ºC)

água filtrada

sal de cozinha

detergente para louças

álcool etílico a 95%, gelado a cerca a cerca de –10 ºC

bastão fino de vidro ou de madeira

coador de café de papel

gelo moído

Procedimentos

1. Pique a cebola em pedaços com aproximadamente 0,5 cm.

2. Coloque quatro colheres de sopa de detergente e uma colher (de chá) de sal em meio copo d'água, mexendo

até os componentes se dissolverem completamente.

3. Coloque a cebola picada no copo com a solução de detergente e sal, e leve ao banho-maria por cerca

de 15 minutos.

4. Retire a mistura do banho-maria e resfrie-a rapidamente, colocando o copo no gelo durante cerca

de 5 minutos.

5. Coe a mistura no coador de café, recolhendo o filtrado em um copo limpo.

6. Adicione ao filtrado cerca de meio copo de álcool gelado, deixando-o escorrer vagarosamente pela borda.

Formam-se duas fases, a superior, alcoólica, e a inferior, aquosa.

7. Mergulhe o bastão no copo e, com movimentos circulares, misture as fases. Formam-se fios esbranquiçados, que são aglomerados de moléculas de DNA

Pratica de DNA 26

DNA de morango

Os morangos que consumimos são plantas da espécie Fragaria ananassa. Estas plantas são Rosáceas, ou seja, são da mesma família das rosas que enfeitam muitos jardins. Elas se reproduzem principalmente por meio do estolão, que é um ramo que cresce paralelo ao chão, gerando brotos de novas plantas. As variedades de morangos que consumimos hoje são resultado de cruzamentos de espécies diferentes que ocorriam, naturalmente na Europa (França e Rússia) e nas Américas (Chile e Estados Unidos).
Uma das razões de se trabalhar com morangos é que eles se prestam muito bem à extração de DNA, porque são muito macios e fáceis de homogeneizar. Morangos maduros também produzem pectinases e celulases, que são enzimas que degradam a pectina e a celulose (respectivamente), presentes nas paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito DNA: eles possuem 8 (oito) cópias de cada conjunto de cromossomos (são octoplóides!).

Materiais (por grupo):

1 saco plástico tipo "zip loc"

1 morango (fresco ou congelado)

10 ml de solução de extração de DNA (veja como fazer abaixo)

Aparato filtrante: 1 filtro de papel com funil ou 1 filtro de pano ou gaze

Álcool etílico gelado (pode ser álcool 70º g.l.)

1 tubo de ensaio limpo

1 bastão de vidro ou 1 palito de madeira (tipo pau-de-laranjeira, para manicure, encontrado em drogarias)

Preparo das soluções e outras notas sobre os materiais

O saquinho tipo "zip loc" deve ser bem espesso. Quanto mais espesso mais resistente e geralmente os saquinhos utilizados para embalar comidas no freezer são apropriados.

Os morangos podem ser frescos ou congelados. Se for usar morangos congelados, deixar descongelar completamente antes de realizar o experimento. Outras frutas macias como Kiwi ou banana podem ser usadas, mas não fornecem ao final tanto DNA.

Solução de extração de DNA (suficiente para 100 grupos)

100 ml de xampu (não contendo condicionador)

15 gramas de NaCl (sal de cozinha) = 2 colheres de chá

900 ml de água (H2O), de preferência mineral

50 ml de detergente podem substituir o xampu (de preferência sem corantes)

O álcool etílico (etanol) deve ser de, no mínimo, 90º g.l. e deve estar gelado.
Se for usar gaze, corte-a em quadrados e dobre em 2 camadas. Corte-a grande o suficiente para poder ficar presa no funil ou na boca do tubo.

Método (ou como fazer)

Coloque um morango, previamente lavado e sem as sépalas (as folhinhas verdes) em um saco zip loc.

Esmague o morango com o punho por, no mínimo, 2 minutos.

Adicione a solução de extração ao conteúdo do saco.

Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto.

Derrame o extrato no aparato filtrante e deixe filtrar diretamente dentro do tubo. Não encha totalmente o tubo (encha somente até 1/8 do seu volume total).

Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que o mesmo esteja cheio pela metade.

Mergulhe o bastão de vidro ou o pau-de-laranjeira dentro do tubo no local onde a camada de álcool faz contato com a camada de extrato.

Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo.

Resultados esperados:

Assim que os participantes derramarem o etanol gelado no extrato de morango eles começarão a notar fitas brancas muito finas de ADN, que se formarão na interface entre as duas camadas. Agitando-se o ADN que se formou na camada de etanol, este formará fibras como as de algodão, que grudarão no objeto que se está usando para misturar (bastão de vidro ou madeira).

O que acontece quando...

Colocamos o detergente? O detergente presente no xampu ajuda a dissolver a bicamada lipídica que compõe a membrana plasmática e as membranas das organelas.

Colocamos o sal? O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído, impedindo que elas precipitem com o DNA.

Colocamos o etanol? O ADN não é solúvel em etanol (álcool etílico).

Quando as moléculas são solúveis em um dado solvente, elas se dispersam neste solvente e não são, portanto, visíveis. Por outro lado, quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, elas se agrupam, tornando-se visíveis. Quanto mais gelado estiver o álcool, menos solúvel o ADN vai estar. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até a hora do experimento.
Bom experimento!

Pratica 27

AULA PRÁTICA 6: Extração de DNA de morango

1. Procedimento:

1. Coloque dois morangos médios em um saco plástico tipo ZipLoc e amasse-os bem.

2. Recolha o macerado e pressione-o, com o auxílio de uma colher, contra a malha de uma peneira

apoiada sobre uma placa de Petri. Enquanto pressionar o macerado contra a malha da peneira, vá

adicionando aos poucos 10 ml de solução de lise*.

3. Transfira a solução para um tubo Falcon de 50 ml e coloque em banho-maria a 60ºC por 10

minutos.

4. Acrescente igual volume de álcool isopropílico gelado, deixando-o escorrer delicadamente pela

parede do tubo.

5. Homogeneíze suavemente até a formação de um aglomerado branco na metade superior do tubo.

6. Remova o enovelado com um palito de sorvete.

*Solução de lise:

- 50g de SDS (sódio dodecil sulfato)

- 8,8g de NaCl (cloreto de sódio)

- 4,4g de C6H5Na3O7 (citrato de sódio)

- 0,3g de EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acetico

- água destilada – q.s.p. 1L

2. Questões:

1. Quais foram os objetivos da realização desta aula prática?

2. Explique as implicações de cada procedimento adotado no decorrer do experimento.

3. É possível visualizar o DNA ao microscópio óptico e distinguir os elementos da sua estrutura? Por quê?

4. Neste processo de extração, quais os possíveis danos causados às moléculas de DNA?

3. Representação molecular do DNA através de modelos tridimensionais

No início da década de 50 do século passado havia disponível, na literatura c

Representação molecular do DNA através de modelos tridimensionais

No início da década de 50 do século passado havia disponível, na literatura científica, algumas

informações a respeito da estrutura química do DNA, a saber:

- a unidade básica constituinte da molécula de DNA é o nucleotídeo, cuja composição compreende

uma base nitrogenada, um açúcar e um grupo fosfato (Phoebus Levene, 1930);

- os nucleosídeos (base nitrogenada ligada quimicamente a um açúcar) estão unidos aos fosfatos

nas posições 3`e 5` das moléculas de desoxirribose, o açúcar do DNA (Alexander Todd, 1950).

- a molécula de DNA apresenta uma proporção numérica de 1:1, tanto entre as bases nitrogenadas

adenina (A) e timina (T), como entre citosina (C) e guanina (G) (Erwin Chargaff ,1950);

Em 1952, Rosalind Franklin, utilizando experimentos com raios-X, descobriu algumas

características relevantes da molécula de DNA, o que finalmente culminou com a elucidação do seu

arranjo espacial em 1953, realizada por James Watson e Francis Crick.

Procedimento: utilizando-se do conjunto de peças plásticas sobre a bancada (as quais representam

o açúcar-fosfato e as bases nitrogenadas) e das informações científicas acima, monte um modelo

molecular do DNA tal como o proposto por Watson e Crick (use peças de uma mesma cor). Em seguida,

represente o processo de duplicação da molécula, utilizando peças de uma cor diferente.

Pratica 28

Extração de DNA de mucosa bucal

1. Bochechar aproximadamente 10-15ml de água com açúcar (3%, uma colher de chá de açúcar em meio copo de requeijão. Uma quantidade maior de células pode ser obtida fazendo um raspado da mucosa com uma espátula de madeira).

2. Acondicione em um tubo cônico com tampa o volume obtido do bochecho (apenas 5ml) e adicione uma pitada de sal de cozinha (para aprox. 1% final).

3. Adicionar algumas gotas (5-10) de detergente diluído à 25% (1:4) e homogeneizar vagarosamente.

4. Aquecer a 55^oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo.

5. Adicionar álcool gelado (absoluto se possível) pelas bordas do copo lentamente, com o auxílio de uma colher de sopa, até que se alcance pelo menos 1cm de espessura.

O DNA (massaroca esbranquiçada) deverá formar um aglomerado e subir.

Extração de DNA de cebola na cozinha

1. Pegue ½ cebola em cubos (como no espaguetti). Pode se utilizar um liquidificador ou mixer quando disponível.

2. Adicionar 50ml de solução de lise (1 colher de sopa de detergente +1 colher de café de sal de cozinha). Elevar o volume com água da pia.

3. Aquecer a 55^oC por 10 min. Resfriar 5 min no gelo.

4. Passar a solução em um filtro de café. Opcional: Ao filtrado, adicionar uma pitada de amaciante de carne.

5. Adicionar álcool gelado (absoluto se possível) pelas bordas do copo lentamente, com o auxílio de uma colher de sopa, até que se alcance pelo menos 1cm de espessura

Será que funciona com outra amostra: ervilha, morango, Yakult, fermento biológico... Por que você não tenta em casa?

Quais são as dicas do "Chef"?

Compare os dois métodos. Quais são as semelhanças e diferenças? Como esse processo funciona?

Como age o detergente?

O detergente dissolve lipídeos e proteínas rompendo a célula.

E a temperatura, o sal e o álcool?

A temperatura elevada (55oC) inativa as DNAses (enzimas que degradam o DNA) e auxilia a dissolução da membrana celular.

O sal (NaCl) possibilita a precipitação dos ácidos nucleicos em solução alcoólica, porque ele bloqueia a eletronegatividade do esqueleto fosfato-açúcar e favorece a aglomeração das moléculas de DNA.

Como DNA não é solúvel em álcool, quando este é adicionado à mistura, todos os componentes da mistura, exceto o DNA, permanecem em solução, enquanto o DNA precipita na camada alcóolica.

Atenção aos cientistas cozinheiros

Os materiais utilizados podem ser perigosos se ingeridos e devem ser manuseados com extrema cautela. O álcool é inflamável e deve ser mantido longe do fogo.

Desenvolvida para o evento Genes no Parque, em comemoração aos 50 anos da descoberta da estrutura do DNA, a atividade DNA na Cozinha foi coordenada por Milton O. Moraes e contou com a participação inestimável de Alejandra N. Martinez, Cláudia F. Alves, Diogo Coutinho, Guilherme Mattos, Patrícia R. Vanderborght, Rocio Saavedro-Acero, Sidra E. Vasconcellos e Viviane M. Câmara. Todos os integrantes desenvolvem atividades de pesquisa no Laboratório de Hanseníase do Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz. Os procedimentos foram desenvolvidos a partir de métodos do laboratório ou descritos por outros autores, segundo o livro Biologia Molecular na Prática Médica e Biológica, de Milton º Moraes

Pratica 29

Extracção do Ácido Desoxirribonucleico em células vegetais

Objectivos

Extrair o ADN das células de folhas jovens de feijoeiro ou morangos, através de um método simples.

Informação introdutória

AULAS PRATICAS DE BIOLOGIA 1ª SÉRIE

Organizadares

Marilda Bezerra Martins Analista

Terezinha Vinhote Meireles

Revisora

Eliane Salete Hirt

PRESENTAÇÃO

estratégias de ensino que poderão auxiliá-lo a ampliar a abrangência e o aprofundamento do conteúdo. Desejamos que este material contribua para novos estudos e

aprimoramento de metodologias e práticas pedagógicas compatíveis com as

Necessidades de nosso tempo.

AULAS PRATICAS, 1 SÉRIE

Boa Vista / RR

Setembro/2012

ravessa do lado menos concentrado em soluto (o interior da célula) para o lado mais co

Atividades Práticas de Biologia

prof Arlindo Costa

PRATICA 01

.IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES

Extração de DNA

Material: cebola grande - 250 gramas; Sal de cozinha - 3gramas; Detergente neutro - 10ml; Álcool etílico

95% gelado; Papel filtro, tubos de ensaio, funil banho-maria a 60oC

Metodologia:

Picar a cebola em pedaços pequenos. Bater no liquidificador e reservar 25g

Preparar 100ml da solução de extração: 3g de sal, 10ml de detergente. Completar com água destilada até

100ml.

Junte a cebola com a solução de extração em um frasco e deixar em banho-maria a 60o C durante 15

minutos. Em seguida, resfrie colocando o recipiente em gelo.

Coe a mistura em papel filtro e recolha o filtrado em um tubo de ensaio.

Despeje, delicadamente, o etanol 95% no tubo de ensaio.

O DNA sobe para o etanol, no qual é insolúvel, ficando preservado e visível

Roteiro de aula prática

IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES

Pratica 02

amido é um polissacarídeo cuja unidade monossacarídica é a glicose. Apresenta-se sob duas formas:

amilose, que consiste de longas cadeias não ramificadas e que na presença de iodo, dão coloração roxoazulada,

e amilopectina, que contém cadeias altamente ramificadas e dão coloração marrom-avermelhada.

Ambas estão presentes em proporções variáveis nos tecidos vegetais de reserva.